- Tên đề tài: Nghiên cứu một số yếu tố môi trường trong nuôi cấy huyền phù tế bào Sâm ngọc linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.)
- Mã số: 19/2013/QĐ/ĐHĐL-NCKH ngày 08/01/2013
- Chủ nhiệm: ThS. Trương Thị Lan Anh
- Cơ quan chủ trì: Trường Đại học Đà Lạt
- Thời gian thực hiện: Từ tháng 01 đến tháng 12 năm 2013
Đề tài được thực hiện trên đối tượng Sâm ngọc linh, còn được gọi là sâm K5 với mục tiêu sau:
- Nhằm xác định điều kiện nuôi cấy mô sẹo khởi đầu;
- Nhằm xác định điều kiện nuôi cấy huyền phù tế bào trong môi trường lỏng;
- Nuôi cấy huyền phù tế bào trong bioreactor nhỏ (5l) để tạo sinh khối, đây là bước trung gian để sản xuất sinh khối Sâm ngọc linh với quy mô lớn hơn.
Ứng dụng bioreactor để nhân sinh khối Sâm ngọc linh.
- Môi trường thích hợp cho nhân nhanh mô sẹo Sâm ngọc linh là 1MS;
- Sự sinh trưởng của mô sẹo Sâm ngọc linh tốt nhất khi được nuôi cấy trong môi trường có hàm lượng KNO3 và CaCl2 từ 0,5 đến 1 so với đvcb và hàm lượng MgSO4 và NH4NO3 tương đương với đvcb;
- Sự sinh trưởng của mô sẹo Sâm ngọc linh tốt nhất trong môi trường MS có bổ sung 1 mg/l 2,4D;
- Hàm lượng đường 30g/l là thích hợp cho sự sinh trưởng của mô sẹo.
- Mật độ mẫu cấy thích hợp nhất cho sự sinh trưởng của huyền phù tế bào Sâm ngọc linh là 60 g/l;
- Việc bổ sung thêm nguồn dinh dưỡng vào trong môi trường nuôi cấy với hàm lượng và thời gian phù hợp có tác dụng thúc đẩy sự sinh trưởng của mẫu cấy. Trong thí nghiệm này, khi bổ sung hàm lượng dinh dưỡng 1/4 MS vào tuần thứ 2 hoặc thứ 3 của quá trình nuôi cấy thích hợp nhất cho sự sinh trưởng của huyền phù tế bào Sâm ngọc linh.
Huyền phù tế bào Sâm ngọc linh sinh trưởng tốt trong bioreactor với tỷ lệ tăng trưởng sinh khối khô là 5,3 lần.
- Quy trình nuôi cấy;
- Báo cáo khoa học.
Đây là cơ sở cho việc ứng dụng bioreactor để nuôi cấy sâm với quy mô lớn nhằm đáp ứng cho nhu cầu thương mại hóa.
Project title: Factors affecting cell suspension culture in Panax vietnamensis Ha et Grushv.
Code number: 19/2013/QĐ/ĐHĐL-NCKH
Coordinator: Truong Thi Lan Anh
Implementing institution: Dalat University
Duration: from 01 to 12/2013
- Establishment of culture conditions for callus culture;
- Establishment of culture conditions for cell suspension culture in liquid medium;
- Cell suspension culture for mass Panax vietnamensis production in bioreactor (5l).
Mass producing cell suspension of Panax vietnamensis by using bioreactor sytem
Based on the present studies, It has been demonstrated that:
- Callus growth were greatest on the MS medium supplemented with 2,4D 1mg/l.
- Callus growth were greatest in the medium supplemented with from 0.5 to 1.0- strength KNO3 and CaCl2, and 1.0-strength NH4H2PO4, MgSO4
- Supplying 30g/l sucrose was optimal for obtaining the maximum of callus growth.
-Density of initial explants also effected on root growth kinetics; 60g/l inoculum density was optimal for cell suspension growth;
- Maximum cell suspension growth was achieved with feeding of the 1/4MS at the end of 2nd or 3rd.
Cells suspension of Panax vietnamensis were developed well in 5l bioreactor. And the growth rate of root was 5.3 folds after 30 days
- Manufacturing Process;
- Scientific reports.
Application of bioreactor system for of Panax vietnamensis revealed that cell mass production in bioreactor was much more effective and would be a potential alternative method to a huge commercial markets of gingseng.